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1病毒简介

显微镜下的诺如病毒诺如病毒感染性腹泻是由诺如病毒属病毒引起的腹泻，具有发病急、传播速度快、涉及范围广等特点，是引起非细菌性腹泻暴发的主要病因。诺如病毒感染性强，以肠道传播为主，可通过污染的水源、食物、物品、空气等传播，常在社区、学校、餐馆、医院、托儿所、孤老院及军队等处引起集体暴发。

诺如病毒遗传高度变异，在同一时期和同一社区内可能存在遗传特性不同的毒株流行。诺如病毒抗体没有显著的保护作用，尤其是没有长期免疫保护作用，极易造成反复感染。

诺如病毒有许多共同特征：直径约为26～35nm，无包膜，表面粗糙，球形，呈二十面体对称；从急性胃肠炎病人的粪便中分离，不能在细胞或组织中培养，也没有合适的动物模型；基因组为单股正链RNA；在氯化铯密度梯度中的浮力密度为1.36～1.41g/cm；电镜下缺乏显著的形态学特征，负染色电镜照片显示，NV是具有典型的羽状外缘，表面有凹痕的小圆状结构病毒。

2病毒特点

显微镜下的诺如病毒诺瓦克病毒（Norwalk Viruses，NV）是人类杯状病毒科(Human Calicivirus，HuCV)中诺如病毒（Norovirus,NV）属的原型代表株。NV是一组形态相似、抗原性略有不同的病毒颗粒。诺瓦克病毒最早是从1968年在美国诺瓦克市暴发的一次急性腹泻的患者粪便中分离的病原。此后，世界各地陆续自胃肠炎患者粪便中分离出多种形态与之相似但抗原性略异的病毒样颗粒，均以发现地点命名，如：Hawaii Virus（HV）、Snow Mountain Virus（SMV）、Mexico Virus（MxV）Southampton Virus（SOV）等，先是称为小圆结构病毒（Small Round Structural Virus,SRSV），后称为诺瓦克样病毒（Norwalk-like virus,NLV）直至2002年8月第八届国际病毒命名委员会批准名称为诺如病毒（Norovirus,NV）。诺如病毒与在日本发现的札幌样病毒（Sapporo-like Virus，SLV），现在的正式名称为札如病毒(Sapovirus,SV)，合称为人类杯状病毒。

NV有许多共同特征：直径约为26～35nm，无包膜，表面粗糙，球形，呈二十面体对称；从急性胃肠炎病人的粪便中分离，不能在细胞或组织中培养，也没有合适的动物模型；基因组为单股正链RNA；在氯化铯密度梯度中的浮力密度为1.36～1.41g/cm3；电镜下缺乏显著的形态学特征，负染色电镜照片显示，NV是具有典型的羽状外缘，表面有凹痕的小圆状结构病毒。^[2]

3传播途径

诺如病毒感染性强，以肠道传播为主，可通过污染的水源、食物、物品、空气等传播，常在社区、学校、餐馆、医院、托儿所、孤老院及军队等处引起集体暴发。疾控专家称，病程为自限性，一般2～3天即可恢复。

诺如病毒的各种传播途径，如牲畜等感染者粪便和呕吐物中可以发现诺如病毒，可以通过几种方式感染诺如病毒：

1、食用诺如病毒污染的食物或饮用诺如病毒污染的饮料； 因为病毒很小，而且摄入不到100个病毒就能使人发病。接触诺如病毒污染的物体或表面，然后手接触到口。

2、直接接触感染者，如照顾病人、与病人共餐或使用相同的餐具也可引起传播。直接接触到感染者(如照顾病人，与病人同餐或使用相同的餐具)。

3、食物可以被污染的手、呕吐物或粪便污染的物体表面直接污染，或者通过附近呕吐物细小飞沫污染。尽管病毒在人体外很难繁殖，但是一旦存在食品或水中，就能引起疾病。

4、有些食品在送至饭店或商店前可能被污染。一些暴发是由于食用从污染的水中捕获的牡蛎。其它产品如色拉和冰冻水果也可能在来源地被污染。

4临床表现

潜伏期多在24～48h，最短12h，最长72h。感染者发病突然，主要症状为恶心、呕吐、发热、腹痛和腹泻。儿童患者呕吐普遍，成人患者腹泻为多，24h内腹泻4～8次，粪便为稀水便或水样便，无粘液脓血。大便常规镜检WBC<15，未见RBC。原发感染患者的呕吐症状明显多于续发感染者，有些感染者仅表现出呕吐症状。此外，也可见头痛、寒颤和肌肉痛等症状，严重者可出现脱水症状。

诺如病毒会引起胃肠道感染。主要症状为恶心、呕吐、腹部痉挛性腹泻，通常持续1-2天，一般在感染病毒后12-48小时出现症状。

5诊断方法

1.临床诊断病例：主要依据流行季节、地区、发病年龄等流行病学资料、临床表现以及实验室常规检测结果进行诊断。在一次腹泻流行中符合以下标准者，可初步诊断为诺如病毒感染：

（1）潜伏期24～48h；

（2）50%以上发生呕吐；

（3）病程12～60h；

（4）粪便、血常规检查无特殊发现；

（5）排除常见细菌、寄生虫及其它病原感染。

2.确诊病例：除符合临床诊断病例条件外，在粪便标本或呕吐物中检测出诺如病毒。

6治疗方法

截至2013年，尚无特效的抗病毒药物，以对症或支持治疗为主，一般不需使用抗菌素，愈后良好。脱水是诺如病毒感染性腹泻的主要原因，对严重病例尤其是幼儿及体弱者应及时输液或口服补液，以纠正脱水、酸中毒及电解质紊乱。

7预防措施

由于诺如病毒感染病是一种常见的肠道传染病，容易在人群密集的场所发生局部聚集病例。因而应共同做好预防工作。

1.注意个人卫生，勤洗手。

2.不吃生冷食品和未煮熟煮透的食物，减少到校外的餐厅就餐，特别是无牌无证的街边小店。

3.减少外出要会和参与大型活动机会，杜绝传染渠道。

4.一有情况，立刻就诊，并报告所在单位、社区。

隔离

对病人、疑似病人和带菌者要分别隔离治疗。

消毒

对病人、疑似病人和带菌者的吐泻物和污染过的物品、空气、饮用水、厕所等进行随时消毒，当染菌者送隔离病房或治愈后进行终末消毒。

健康教育

加强以预防肠道传染病为重点的宣传教育，提倡喝开水，不吃生的半生的食物，尤其是禁止生食贝类等水产品，生吃瓜果要洗净，饭前便后要洗手、养成良好的卫生习惯。

免疫接种，尚无理想的疫苗。

加强饮用水卫生

要加快城乡自来水建设。在暂时达不到要求的地区，必须保护水源，改善饮用水条件，实行饮水消毒。

抓好饮食卫生

严格执行《中华人民共和国食品卫生法》，特别要加强对饮食行业（包括餐厅、个体饮食店、学校周边饮食摊档等）、农贸集市、集体食堂等的卫生管理。食物加工者要严格注意个人卫生，一旦发病立即调离工作岗位。

病人、接触者及其直接接触环境的管理。

突发疫情报告

责任疫情报告人发现突发疫情后，城镇于6h内，农村于12h内以最快的通讯方式向发病地的疾病预防控制机构报告。

流行期措施

夏季是诺如病毒感染性腹泻的高发季节。感染对象主要是成人和学龄儿童。“诺如病毒感染性腹泻具有发病急、传播速度快、涉及范围广等特点，感染者主要症状为恶心、呕吐、发热、腹痛和腹泻，感染后24-48小时出现症状（短至18小时，长至72小时）。”儿童患者呕吐普遍，成人患者腹泻为多，24小时内腹泻4～8次，粪便为稀水便或水样便，无粘液脓血。开展群众性爱国卫生运动，搞好环境卫生，及时清除、处理垃圾和人畜粪便。

做好水源保护和饮用水消毒。

加强食品卫生法的执法力度，做好食品卫生监督管理工作。

做好肠道传染病的卫生防病宣传教育和动员工作，在发生流行时发动群众自觉停止一切宴请聚餐，发生吐、泻时及时到医院肠道门诊就医。

加强肠道门诊工作，作到逢泻必检，逢疑必报。对发现的病人及时隔离治疗。

加强饮食卫生，禁食生、半生食物。

加强个人卫生，及时用肥皂或洗手液洗手，待肥皂泡持续10秒后冲洗干净。^[3]

为了防止诺如病毒感染性腹泻的发生，需要保持良好的卫生习惯，勤洗手，食用洗净或煮熟的食物，经常清洁衣物和物体表面，防止病从口入。一旦出现呕吐、腹泻等症状应及时就医。

8爆发案件

中国

2010年12月广州从化发生一起水污染引起的诺如病毒感染事件，共有429人发病，无人死亡。从化诺如病毒感染事件属一般级别事件，调查后最终确认是水污染引起的诺如病毒感染事件。

2014年2月19日，嘉兴市海宁市、海盐县两地部分学校爆发诺如病毒，总计有400多名学生感染就医。海宁市教育局已经通知该市学校自至周5停课，双休日正常休息，下周1再恢复正常教学。

病情发生后，当地县政府于下午启动了一般突发公共卫生事件(IV级)应急响应。县卫生、食药等部门已经展开了对学校教室、寝室、厕所全面消毒工作并开窗通风等一系列防治措施。

截至2014年2月20日，疫情涉及海宁市、海盐县的10所学校、3家幼儿园，累计报告发病人数共511人。

2014年3月20日，北京市东直门香河园路一幼儿园内，多名孩子突然出现呕吐症状，园方负责人称，幼儿园共有20个孩子患病，主要集中在小班和中班。经疾控中心对其中两名患病孩子的诊断，确认受诺如病毒感染。

2014年5月20日，经江苏无锡市疾控中心实验室检测确定，日前发生在惠山区长安中心小学多名学生呕吐、腹泻症状系感染诺如病毒引起。截止5月20日确认该校患呕吐、腹泻症状的学生为39例，其中38例已痊愈，1例在医院补液治疗。

德国

2012年9月底，德国首都柏林以及东部三个地区1万多名小学生和托儿所的幼儿在学校疑似因吃了中国进口的冷冻草莓而发生食物中毒。德国当局随后已将此情况通报欧盟其他伙伴国，并从10月2号起回收了所有中国冷冻草莓。德国联邦消费者保护部当地时间8日公布消息，罗勃特科赫研究院已在一包嫌疑草莓中找到了可引起非细菌性急性胃肠炎的诺罗病毒。正是这批草莓引发了德国东部大规模呕吐腹泻肠胃病。

日本

2012年12月4日，日本福冈市一幼儿园26名孩子集体感染诺如病毒，出现呕吐、腹泻等症状。日本国立传染病研究所针对这一情况表示，进入12月上旬后，日本全国将大规模爆发诺如病毒，呼吁日本所有民众做好预防。谁知话音未落，日本大阪就发生了一起集体感染诺如病毒事件，有两人死亡。日本政府呼吁，各地的保健所要对公共场所彻底清洁消毒，并且对呕吐物处理后也要进行彻底消毒灭菌。

2012年6月18日，前往中国修学旅行的日本石川县立二水高中学生回国后出现腹泻、发烧等症状一事，金泽市保健所调查获悉，截至18日，出现上述症状的人数已升至139人。保健所认为学生们可能患感染性肠胃炎。

357名高二学生从11日起前往上海、苏州等地进行了4天3夜的旅行。14日回国后，翌日便有16人缺课、16人早退。校方随即与金泽市保健所取得了联系。已有一名学生被检出诺罗病毒，但感染并未扩大至学生家人及其他年级。

在2012年12月13日到12月16日期间，日本各地接连发生一系列因诺如病毒而引起的集体食品中毒事件。中毒人数由爱知县名古屋市的49人增加到千叶县成田市的60多人，再到山梨县甲斐市的319人，最后到广岛县广岛市的1381人。据日本厚生劳动省透露，这是日本自1996年以来，规模最大人数最多的一起集体食物中毒事件。

美国

显微镜下的诺如病毒美国疾病控制和预防中心31日说，美国一艘前往加勒比海巡游的游轮上有近700名乘客和船员出现肠胃疾病，而祸首则是诺如病毒。

实验室检测表明，诺如病毒导致“皇家加勒比游轮”公司的“海洋探索者”号游轮上634名游客和55名船员出现呕吐、腹泻等症状，“这是20年来最大的一次诺如病毒疫情暴发”。

“海洋探索者”号21日从美国新泽西州港口出发，前往加勒比海巡游，原计划行程10天。但很快船上就暴发了疫情，游轮不得不提前两天于29日返回。船上共有3071名乘客和1166名船员。“皇家加勒比游轮”公司已决定给乘客退回一半的费用，并给他们提供其他补偿。

美国又有一艘名为“加勒比公主”号的游轮疑似出现诺如病毒疫情，约170名乘客与船员患病。诺如病毒是一种可引起急性胃肠炎的病毒。感染者的主要症状为恶心、呕吐、发热、腹痛和腹泻，严重时可因腹泻脱水致死。诺如病毒感染性强，能通过受污染的水源、食物、物品、空气等传播，可在学校、餐馆、医院、托儿所等地集中暴发。

9实验诊断

标本采集

粪便标本应在发病首日采集，至多不能超过发病急性期(48～72h)，此时为稀、软便，病毒排出量最多。一次流行，至少采集10例患者粪便，每份标本量约1～5ml，成形便和肛拭子诊断意义很小。标本置4℃可存放2～3周，运送也要低温条件。病人呕吐物是粪便标本的最佳补充，有助于病原的诊断。该标本的采集、储存和运送条件同于粪便。从流行病学角度出发，在水、食物或其它外环境标本中检出NV意义重要。需注意检测技术要锁定在高度怀疑的传播媒介上，尽早采样并置4℃存放，若是饮用水，需用大容量(5～100L)浓集病毒后检测。

实验检查

诺如病毒预防宣传图电镜法

直接电镜法(EM)和免疫电镜法(IEM)，EM 法观察的灵敏度较低，要求每毫升粪便样品中至少有大约 106个病毒粒子，因此只能用于患病早期病毒大量排出时采集的样本检测。IEM 法比 EM 法的敏感性可提高 100 倍，主要应用患者恢复期血清捕捉同型抗原，从而增加检出率。电镜法的缺陷在于设备昂贵，不能广泛普及；检测结果与操作者的技能和经验有直接关系；灵敏度相对较低；不适于大规模流行病学调查。

免疫法

包括放射免疫法(RIA)、生物素-亲和素免疫法(Biotin-Avidin Immunoassy)和酶联免疫法(ELISA)。RIA法的灵敏度比IEM 法可 提高10～100倍，可以检测出抗体升高的水平，为流行病学提供更有参考价值的资料。RIA 法的不足之处在于它需要 6 d，且需要放射性同位素标记。为了简化方法，美国疾病预防控制中心建立了生物素-亲和素免疫法，其灵敏度与 RIA 法相当，该方法已成为美国疾病预防控制中心检测NLV抗原和抗体的标准实验方法之一。1992年Jiang 等重组杆状病毒表达NV衣壳蛋白成功后，建立起的 NV 酶联免疫检测方法快速、灵敏、经济，其不足之处是免疫反应的株型特异性太强，所以应用范围还比较窄。酶链免疫法特异性强，灵敏度高，诊断迅速，且较经济，是可广泛应用的检测方法。由于NLV培养还未成功，原来用作试剂的病毒抗原数量受到限制，现在，用分子生物学技术已经可以人工重组NV的衣壳蛋白，从而解决了上述问题。

诺如病毒感染示意图分子生物学检测方法

杂交技术和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)除了能更准确、灵敏地检测标本中的NV，尤其是低浓度的NV感染外，最大的优点在于可以进一步对病毒进行基因型的研究，不会受到获得分型单克隆抗体的限制，对流行病学研究具有重要意义。

等温核酸扩增法 (NASBA)直接扩增RNA 来检测 NV，样品中病原RNA得到指数级扩增，产物通过琼脂糖凝胶电泳或斑点印迹杂交鉴定结果。该方法的灵敏度略低于 RT-PCR 法；整个过程只有一步RNA扩增，避免了RT-PCR存在的RNA交叉污染；缩短了操作时间；假阳性率低。

食物检测

RT-PCR检测食物中NV存在样品病毒量含量低，样品量大且成分复杂等问题，因此病毒富集浓缩、样品处理是检测的关键，其中有两个重要方面影响检测结果，一是样品中病毒浓缩后的回收率，二是抽提核酸的完整程度和纯度。

病毒浓缩

病毒浓缩 NV 浓缩方法一般分为两大类，一类为有机絮凝沉淀法，主要使用聚乙二醇（PEG）沉淀，PEG 是具有强烈吸水性以及凝聚和沉淀蛋白作用的高分子聚合物，先改变样品 pH 值，使毒粒与样品微粒分开，PEG 把病毒沉淀下来，达到浓缩的目的。对于固体样品 PEG 沉淀法是最有效的浓缩方法。

感染了诺如病毒的人们膜过滤法是另一类有效浓缩病毒的方法，通过改变膜的pH值使之与带有电荷的毒粒结合捕捉病毒，这种方法通常用在浓缩大体积的黏度小、内容颗粒小的液体食品或水中。检测海水、生活污水中的NV曾用过这种方法，为瓶装水和其他饮料浓缩NV提供了参考。

核酸提取

食品样品成分复杂，所含有的脂肪、蛋白质、金属离子等物质都是 RT-PCR 反应抑制因子。NV是单链RNA病毒，核酸提取方法的优劣取决于两个方面：核酸的质量和去除抑制因子的能力。应用较成熟广泛的是胍法 RNA 提取法，即（异）硫氰酸胍-苯酚-氯仿联合裂解抽提法，该方法改进后制成市售的TRIzol、RNAzol、Ultraspec 等产品，与石英砂、磁珠等多孔颗粒相结合，已结合了poly(dT) 或特异探针的磁珠能较高程度的提纯mRNA，去除反应抑制因子。石英砂或磁珠纯化 RNA与传统的有机试剂（异丙醇、乙醇）沉淀 RNA 相比起来，效果较好，只是成本偏高。

10易感人群

北京多个小学校中出现了由“诺如病毒”引发的聚集性疫情，主要症状为呕吐。北京市疾控中心专家介绍，“诺如病毒”会引起胃肠道感染，提醒学校和幼儿园注意执行晨午检制度，发现病例应采取隔离和消毒措施。

集体呕吐

据悉，“诺如病毒”曾成为美国一艘游轮近700名乘客、船员的肠胃疾病祸首，浙江嘉兴近期也有部分学校爆发诺如病毒，引发社会关注。

3月底，北京当代moma国际幼儿园一位家长表示，幼儿园20名孩子集体出现呕吐症状，家长疑为食物中毒，后经疾控部门确认受诺如病毒感染。

感染人群

“诺如病毒”是否已在北京幼儿园、学校等儿童聚集区域出现？北京市疾控中心证实，近期，北京市多个小学校中出现了由诺如病毒引起的聚集性疫情，均为6-7岁儿童，涉及学生数量较多。

相关负责人表示，在学校、幼儿园等场所，应注意执行晨午检制度，以便早期发现病例。发现病例之后，应及时采取隔离和消毒措施。